Sirolimus influence on hepatectomy-induced liver regeneration in rats / Efeito do sirolimo na regeneração hepática induzida por hepatectomia no rato

OBJECTIVE: To evaluate the influence of sirolimus on liver regeneration triggered by resection of 70% of the liver of adult rats. METHODS: we used 40 Wistar rats randomly divided into two groups (study and control), each group was divided into two equal subgroups according to the day of death (24 hours and seven days). Sirolimus was administered at a dose of 1mg/kg in the study group and the control group was given 1 ml of saline. The solutions were administered daily since three days before hepatectomy till the rats death to removal of the regenerated liver, conducted in 24 hours or 7 days after hepatectomy. Liver regeneration was measured by the KWON formula, by thenumber of mitotic figures (hematoxylin-eosin staining) and by the immunohistochemical markers PCNA and Ki-67. RESULTS: there was a statistically significant difference between the 24h and the 7d groups. When comparing the study and control groups in the same period, there was a statistically significant variation only for Ki-67, in which there were increased numbers of hepatocytes in cell multiplication in the 7d study group compared with the 7d control group (p = 0.04). CONCLUSION: there was no negative influence of sirolimus in liver regeneration and there was a positive partial effect at immunohistochemistry with Ki-67. .

OBJETIVO: avaliar a influência do sirolimo sobre a regeneração hepática desencadeada pela ressecção de 70% do fígado de ratos adultos. MÉTODOS: utilizaram-se 40 ratos Wistar que foram divididos aleatoriamente em dois grupos (estudo e controle), cada grupo foi subdividido em dois subgrupos iguais conforme o dia da morte (24 horas e sete dias). O sirolimo foi administrado na dose de 1mg/kg/dia no grupo de estudo e no grupo controle foi administrado 1ml de solução salina. As soluções foram administradas diariamente, desde três dias precedentes à hepatectomia até a morte dos ratos, para a retirada do fígado regenerado, realizada em 24h ou 7d após a hepatectomia. A análise da regeneração hepática foi mensurada pela fórmula de KWON, número de figuras de mitose pela técnica de hematoxilina-eosina e pelos marcadores imunoistoquímicos PCNA e Ki-67. RESULTADOS: demonstrou-se variação estatisticamente significativa quando comparado os grupos 24h com os grupos 7d através dos métodos de análise. Ao comparar os grupos de estudo e controle no mesmo período demonstrou-se variação estatisticamente significativa apenas pelo Ki-67 no qual foi verificado aumento do número de hepatócitos em multiplicação celular no grupo de estudo de 7d quando comparado com o grupo controle de 7d (p=0,04). . CONCLUSÃO: não demonstramos influência negativa do sirolimo na regeneração hepática e houve efeito parcial positivo pela análise imunoistoquímica utilizando Ki-67. .

Proliferative effect of aqueous extract of Hyptis fructicosa on liver regeneration after partial hepatectomy in rats / Efeito proliferativo do extrato aquoso da Hyptis fructicosa na regeneração hepática após hepatectomia parcial em ratos

PURPOSE: To evaluate the effect of aqueous extract of Hyptis fructicosa on hepatic regeneration after partial hepatectomy in rats. METHODS: Sixteen rats were divided in two groups: C (Control Group) and HF (Whose rats received aqueous extract of Hyptis fructicosa during 4 days using the dose of 100 mg/kg/day). On the consecutive day of this treatment, the animals of both groups underwent hepatectomy of about 67 percent of liver. Twenty four hours later, they were sacrificed, and the remaining mass of liver was removed and prepared to be studied through the PCNA immunohistochemical technique. RESULTS: The liver regeneration index of HF group was 53.56 ± 18.91 percent, while in C group was 21.12 ± 8.29 percent (p=0.0003). CONCLUSION: These results show that the administration of aqueous extract of Hyptis fructicosa using the dose of 100mg/kg/day increased the hepatocyte proliferation in the group HF.

OBJETIVO: Avaliar o efeito do extrato aquoso da Hyptis fructicosa sobre a regeneração hepática após hepatectomia parcial em ratos. MÉTODOS: Dezesseis ratos foram divididos em dois grupos: C (grupo controle) e HF (ratos que receberam o extrato aquoso da Hyptis fructicosa durante quatro dias na dose de 100mg/kg/dia). No dia consecutivo deste tratamento, os animais de ambos os grupos foram submetidos a hepatectomia de aproximadamente 67 por cento do fígado. Vinte e quatro horas depois, eles foram sacrificados, e que a massa restante do fígado foi retirado e preparado para ser estudado através da técnica de imuno-histoquímica PCNA. RESULTADOS: O índice de regeneração hepática do grupo HF foi 53,56 ± 18,91 por cento, enquanto no grupo C foi de 21,12 ± 8,29 por cento (p=0,0003). CONCLUSÃO: Estes resultados mostram que a administração do extrato aquoso da Hyptis fructicosa na dose de 100mg/kg/dia aumentou a proliferação de hepatócitos no grupo HF.

Proliferating cell nuclear antigen (PCNA), p53 and MDM2 expression in Hodgkins disease

CONTEXT AND OBJECTIVE: Tumor cells in Hodgkins disease (HD) express cell proliferation markers that are evaluated according to the oncogenes involved or the expression of their proteins. Correlations between the protein expression grade and clinical data are now important for disease prognosis. DESIGN AND SETTING: This was a retrospective analysis on proliferating cell nuclear antigen (PCNA), p53 and MDM2 (murine double minute-2) expression using immunohistochemistry, on formalin-fixed, paraffin-embedded tissues from diagnostic biopsies on 51 patients with HD. The study was conducted at the Division of Hematology and Transfusion Medicine, Hospital São Paulo, Universidade Federal de São Paulo. METHODS: Antigen expression was evaluated as the proportions of positive Hodgkin and Reed-Sternberg (HRS) cells and reactive lymphocytes (L), which were compared using Spearman correlation coefficients. The Friedman test was used for comparisons between the markers. The Pearson test was used to investigate associations between marker expression and clinical and laboratory parameters, marrow involvement, complete remission (CR) and overall survival (OS) rates. RESULTS: There was overexpression of antigen proteins in HRS, in relation to L (p < 0.001). In HRS, MDM2 was higher than p53 and PCNA (p < 0.003), while the latter two were equivalent. In L, p53 was lower than MDM2 and PCNA (p < 0.001), while the latter two were equivalent. There was no relationship between protein expression and clinical and laboratory variables or outcome. CONCLUSIONS: PCNA, p53 and MDM2 are tumor markers for HD, but showed no clinical or prognostic significance in our analysis.

CONTEXTO E OBJETIVO: As células tumorais da doença de Hodgkin (HD) são positivas para marcadores de proliferação celular que são analisados por seus genes e respectivas proteínas. A correlação entre a expressão destas proteínas e os parâmetros clínico-laboratoriais são, no momento, de importância para o prognóstico da doença. TIPO DE ESTUDO E LOCAL: Estudo retrospectivo da expressão do antígeno de proliferação celular (PCNA) e da p53 e MDM2 em tecidos obtidos ao diagnóstico, fixados por formol, embebidos em parafina de 51 pacientes com HD. O trabalho foi realizado na Divisão de Hematologia e Transfusão, Hospital São Paulo, Universidade Federal de São Paulo. MÉTODOS: As expressões antigênicas foram analisadas através da proporção de células de Hodgkin e células de Reed Sternberg (HRS) e linfócitos reacionais (L) positivos. A intensidade de expressão de cada proteína foi comparada entre L e HRS através do coeficiente de Spearman. A comparação da PCNA, p53 e MDM2 em L e HRS se fez pelo teste de Fiedman. As correlações entre variáveis clínico-laboratoriais, comprometimento da medula óssea, taxas de sobrevida geral e remissão clínica com as proteínas em HRS se fizeram pelo coeficiente de Pearson. RESULTADOS: Houve superexpressão das três proteínas em células HRS comparadas aos L (p < 0,001). Nas células HRS, a MDM2 foi maior que a p53 e a PCNA (p < 0,003), que foram equivalentes. Nos L, a p53 foi menor que a MDM2 e a PCNA (p < 0,001), que foram equivalentes Não houve relação entre as expressões das proteínas com as variáveis clínico-laboratoriais e sobrevida. CONCLUSÕES: PCNA, p53 e MDM2 são marcadores tumorais na HD, porém não mostraram significado clínico-prognóstico em nossa análise.

Expressão imuno-histoquímica dos marcadores pcna, KI67 e p53 em carcinomas epidermóides do trato aerodigestivo superior / Immunohistochemical expression of markers pcna, Ki67 and p53 in squamous cell carcinomas of upper aerodigestive tract

Objetivo: Os carcinomas epidermóides do trato aerodigestivo superior são tumores de comportamento biológico heterogêneo. O objetivo deste trabalho é verificar se a expressão imuno-histoquímica dos marcadores Ki67, PCNA e P53 apresenta correlações com parâmetros prognósticos clínico-patológicos. Métodos: Determinação da expressão imuno-histoquímica dos antígenos Ki67, PCNA e P53 em espécimes tumorais fixados e embebidos em parafina de 53 pacientes com carcinoma epidermóide em diferentes sítios primários do trato aerodigestivo superior. Resultados: Os marcadores tiveram altos índices de expressão imuno-histoquímica, sendo 46,5% para o Ki67, 66,5% para o PCNA e 36,5% para o P53. Não houve correlação da expressão do Ki67 e do PCNA com o estadiamento TNM (AJCC), nem com o grau de malignidade. Aexpressão do Ki67 apresentou correlação positiva com a expressão do PCNA (p = 0,037). O mesmo aconteceupara o PCNA e o número de mitoses por campo (p = 0,001). Conclusões: De acordo com estes resultados, concluiu-se que a determinação da imunorreatividade dos marcadores Ki67 e PCNA é um método objetivo e quantificável para avaliar proliferação celular que pode subsidiar as informações prognósticas.

Background: Squamous cell carcinomas of upper aerodigestive tract are tumors with heterogeneous biological behaviour. The aim of present study is to assess whether any correlation exists between immunohistochemical expression of Ki67, PCNA and P53 markers and clinicopathologic parameters. Methods: Immunohistochemical determination of Ki67, PCNA and P53 antigens in fixated and paraffinembedded tumour especimens from 53 patients with squamous cell carcinoma in different primary locations of upper aerodigestive tract. Results: The markers had high evidence average rates with 46,5% forKi67, 66,5% for PCNA and 36,5% for P53. There was neither correlation of Ki67 and PCNA evidence nor with TNM staging nor with malignancy degree. The expression of Ki67 demonstrated correlation with the expression of PCNA (p = 0,037). The same ocurred to PCNA and the number of mitoses (p = 0,001). Conclusions: According to these results, it has been concluded that the determination of immunoreactivityof Ki67 and PCNA proliferation markers is an accurate and quantitative method which may provide prognostic information.